抗体交联是什么意思(什么叫交联电缆)

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大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。—1—上个月崔工做了一个调查问卷问卷的内容是你知道国内做流式荧光微球的厂家有哪些吗?昨天将后台统计结果公布给了大家,并告知大家可能还有老师没来得及填写调查问卷,也有厂家没有列在名单中,有遗漏的大家可以给崔工发私信,崔工会加上去。今天就有老师联系崔工,告诉崔工还有那些,现更新如下

大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。


1

上个月崔工做了一个调查问卷

问卷的内容是你知道国内做流式荧光微球的厂家有哪些吗?

昨天将后台统计结果公布给了大家,并告知大家可能还有老师没来得及填写调查问卷,也有厂家没有列在名单中,有遗漏的大家可以给崔工发私信,崔工会加上去。

今天就有老师联系崔工,告诉崔工还有那些,现更新如下:

国产流式荧光微球厂家

序号

厂家名称

1

厦门福流生物

2

苏州纳微生物

3

深圳唯公

4

湖北新纵科

5

北京指真生物

6

北京胡曼智造

7

苏州为度

8

杭州中瀚盛泰


2

昨天有老师问崔工,FITC与抗体交联的原理是什么?

崔工先讲下什么是FITC?

FITC,中文名异硫氰酸荧光素,又称为荧光素-5-异硫氰酸盐,其形态为黄色粉末,有吸湿性,易溶于水和酒精溶剂,在避光干燥条件下可保存多年,是一种生化试剂。

分子式:C21H11NO5S

分子量:389.38

抗体交联是什么意思(什么叫交联电缆)

最大吸收光波长为490-495nm

最大发射光波长为520-530nm

它能与各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光,加酸后析出沉淀,荧光消失。

通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。

用于医学,农业和畜牧等方面,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。


3

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的R氨基与FITC荧光素的硫碳胺键结合,形成FITC蛋白质结合物。

抗体交联是什么意思(什么叫交联电缆)

具体的标记方法如下:

(1)将待交联的蛋白(浓度≥1mg/mL)对交联反应液透析三次4℃,至pH=9.0。交联反应液配制方法:7.6gNaHCO3,1.06gNa2CO3,7.36gNaCl,加水定容至1L。

(2)将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。

(3)按P:F(蛋白质:FITC)=1mg:150μg的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,暗处4℃反应8h。

(4)加入5mol/L的NH4CL至终浓度50mmol/L,4℃终止反应2h。

(5)将交联物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。

(6)交联物的鉴定

蛋白浓度(mg/mL)=[A280-0.31×A495]/1.4

F/P比例:3.1×A495/[A280-0.31×A495],该值应介于2.5~6.5之间。

(7)FITC交联的蛋白应置于Ph7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1%NaN3、1%BSA,4℃避光保存。

最后储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。

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